19/06/2024
200nt RNA的酶促合成
200nt RNA的酶促合成

近日,我公司苏州图维生物在RNA的合成中又一次取得了进步,依托我们的技术平台nMECA,我们已成功实现了200nt RNA的酶促合成。

图1 RNA质检结果

左:Urea-PAGE电泳;中:LC-MS质谱结果;右:HPLC分析结果


我们的产品保持高质量,如图一所示,Urea-PAGE电泳检测:目的条带单一,大小与理论一致;HPLC分析成品纯度,按照峰面积归一化法测得纯度大于90%;LC-MS测定分子量,与预测值误差在万分之五以内。

我们在长链RNA合成上取得的进步,可以很好的支持先导编辑技术的发展。

先导编辑是一种新兴的基因编辑技术,无需额外的DNA模板便可以实现4种碱基的任意变换,还能有效实现多碱基的精准插入与删除(最多可插入44bp的碱基,可删除80bp的碱基)[1],该系统囊括了CRISPR/Cas9系统和碱基编辑系统的优点,更具优势,同时相比于传统的HDR,PE无需DNA双链断裂即可实现编辑,安全性也更高。

先导编辑中使用pegRNA长度远远大于100nt,随着该技术的升级进步,使用的RNA的长度也在不断增加。而我们这次在合成长度上的进步,可以完全覆盖先导编辑所使用的RNA的长度。

图2 epegRNA的结构示意图(长度:158nt)[2]


我们公司将继续致力于RNA酶促合成技术的研发和优化,进一步提升合成长度和纯度。同时,我们也期待与更多的科研机构和企业合作,共同推动RNA合成技术的发展和应用,助力生命科学的发展。


[1] Anzalone AV, Randolph PB, Davis JR, Sousa AA, Koblan LW, Levy JM, Chen PJ, Wilson C, Newby GA, Raguram A, Liu DR. Search-and-replace genome editing without double-strand breaks or donor DNA. Nature. 2019 Dec; 576(7785): 149-157.

[2] Doman JL, Sousa AA, Randolph PB, Chen PJ, Liu DR. Designing and executing prime editing experiments in mammalian cells. Nat Protoc. 2022 Nov; 17(11): 2431-2468.

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